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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS6321229 |
商品介紹：
測定意義： 海藻糖是由兩個葡萄糖分子以α，α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖，廣泛存 在于細菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無脊椎動物和高等植物等多種有機體中。海藻糖的非還原性決定了它對酸、堿、高溫等的穩定性。另外，它本身具有很強的吸水性，使它在生物體內具有抗脫水作用，在逆境條件下可通過識別外界刺激、產生和傳遞信號、基因表達和代謝調節來保護植物免受不良環境的傷害。 植物體內主要以葡萄糖為底物合成海藻糖，該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6-磷酸葡萄糖反應生成中間產物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 （trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，測定TPS活性對于研究植物逆境具有重要意義。 測定原理： TPS催化UDPG與G6P生成海藻糖-6-磷酸，同時產生UDP；UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下，氧化NADH為NAD+，NADH的下降速率與UDP含量成正比，通過340nm吸光度下降速率反映TPS活性。 需自備的儀器和用品： 酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
甘草單鹽(標準品)英文名： Deoxyshikonin離子通道四聚體結構域蛋白5抗體包裝1g
甘草二鹽（標準品）英文名： Tariquidar,XR-9576高分子量激肽原重鏈抗體包裝250mg
甘草異黃A英文名： Titan yellow通道四聚體結構域蛋白11抗體包裝25g
甘木通（標準品）英文名： SasapyrineKelch樣蛋白26抗體包裝5g
甘青青蘭（標準品）英文名： Sasapyrine賴，天冬，谷，亮相關序列抗體包裝25g
甘松（標準品）英文名： Lurasidone HClKelch樣蛋白10抗體包裝5g
甘遂（標準品）英文名： Lurasidone HClKelch樣蛋白11抗體包裝25MG
甘西鼠尾草英文名： PrunetinKelch樣蛋白3抗體包裝100g
甘油三油酯（標準品）英文名： Aromadendrin(Dihydrokaempferol)Kelch樣蛋白14抗體包裝25g
苷松新（標準品）英文名： 3',4',7-TrihydroxyflavoneKelch樣蛋白31抗體包裝5g
橄欖苦苷（標準品）英文名： DiclazurilKelch樣蛋白32抗體包裝1g
崗梅（標準品）英文名： Metacycline HCl;Methacycline HCl電壓閥門通道混合器相關亞家族成員5抗體包裝250mg
崗松（標準品）英文名： Metacycline HCl;Methacycline HClTGF-β誘導早期應答基因1抗體包裝5g
杠柳次苷英文名： Adipic dihydrazide離子通道蛋白Kv1.3抗體包裝25g
杠柳苷(標準品)英文名： Linolenic acid磷化KLF5抗體包裝5g
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質量規格：>99%,BR抗胰島受體抗體試劑盒告達庭;Caudatin
ATCC05595=DSM7136資源名稱: 施氏假單胞菌 質量規格：HPLC>98%,標準品抗試劑盒鬼臼-4-O-葡萄糖苷;Podoph
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格：含量：Imipenem≥400μg/mg，Cilastatin(C16H26N2O5S) ≥400μg/mg,USP36抗眼肌抗體試劑盒高黃芩;Sculartln
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測試盒100管/96樣熒光假單胞 4-(6-氨基-3-吡啶基)哌-1-甲酸叔丁酯氨甲基轉移Elisa
蘑菇輪枝孢 3,6-二咔唑1-脫氧木酮糖-5-磷酸合成Elisa
大腸埃希氏 6-乙酰氨基己酸牻牛兒基焦磷酸合Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 6-乙酰氨基己酸1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸還原異構Elisa
棲稻假單胞 5-溴-2--4-甲氧基嘧啶4-羥基-3-甲丁-2-烯基二磷酸還原Elisa
白僵 聚六亞甲基胍鹽酸鹽,~25%水溶液谷合成Elisa
好食脈孢 1-乙酰基胍ω-2脂肪酸脫氫Elisa
厚垣普奇尼亞* 3,5-二溴苯甲玉米赤霉烯酮Elisa
卷枝毛霉原變型 3-溴-5-脫氧雪腐鐮孢烯Elisa
谷棒桿 N-2-[(4-1H-咪唑基)乙基]-3-氨基酰核糖核酸Elisa
黃柄曲霉 2-二甲基氨吡啶多巴色互變Elisa
根瘤 (S)-3-羥基丁酸乙酯DHICA氧化Elisa
運動節桿 4-甲酰氨基-N-乙酰乙酰苯內皮Elisa
云芝 2,5-二并惡唑異戊烯基焦磷酸異構Elisa
中生根瘤 5-氨基-2-氟β-香樹合成Elisa
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