堿性固綠染色液公司正在銷售的產品：豚鼠熱休克轉錄因子1(HSF1)試劑盒 Anti-N Cadherin/CDH2 Antibody鋅指蛋白263抗體
豚鼠III型前膠原氨基端原肽(PIIINP)試劑盒Anti-NAB2 Antibody鋅指蛋白195抗體
豚鼠胰島素樣生長因子結合蛋白7(IGFBP-7)試劑盒Anti-N WASP/WASL Antibody鋅指蛋白266抗體
豚鼠鞘脂激活蛋白原

產品分類：細胞染色

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：顯示細胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。

5）   之后更換正常培養基培養即可。

(標準品) EicosaneGA結合蛋白轉錄因子α/GABP-α抗體包裝1g

青蒿(標準品) HeneicosaneGA結合蛋白轉錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體包裝25g

青皮（標準品） Docosane 谷脫羧65+谷脫羧67抗體包裝5g

青藤堿(標準品) Tricosane谷脫羧樣蛋白1抗體包裝10mg

青陽參苷元A（標準品） Tetracosane葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體包裝1g

青陽參苷元B（標準品） Pentacosaneα葡萄糖苷/溶體α-葡糖苷抗體包裝5g

氫檳榔堿（標準品） Methyl n-Octanoate生長因子受體結合蛋白2相關蛋白3抗體包裝1g

氫東莨菪堿（標準品） Methyl Nonanoate 生長因子受體結合蛋白2相關蛋白4抗體包裝5g

氫高烏（標準品） Methyl Laurate G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體包裝1g

苘麻子（標準品） Methyl Myristate磷化G基丁B型受體2抗體包裝5g

秋仙堿(標準品) Methyl StearateG蛋白偶聯受體結合蛋白α11/Gα 11 抗體包裝1g

丁（標準品） Methyl LinolenateG3BP2蛋白抗體包裝5g

驅蟲斑鳩菊（標準品） Methyl Linoleateγ基丁運載蛋白2抗體包裝1g

去斑蝥(標準品） 1-Undeceneβ1-6 N-乙酰基葡萄糖轉移3抗體包裝5g

去斑蝥（標準品） 1-Dodecene β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉移7抗體包裝1g

海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質量規格：>98%,標準品凝血受體試劑盒木糖;Xylitol

邊緣假單胞菌Pseudomonas│marginalis 質量規格：>98%,USP,BR凝血抗凝血復合物試劑盒莽草;Shikimic acid

纖維單胞菌Cellulomonas│sp. 質量規格：>98%凝血試劑盒木蝴蝶苷B;Oroxin B
堿性固綠染色液PEPT2 (Peptide-transporters 2)  腸道肽轉運蛋白2/小肽轉運蛋白2抗原規格： 0.5mg

PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase)  蛋白激meiR樣內質網激mei抗原規格： 0.5mg

FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein)  纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原規格： 0.5mg

P-GP(P-glycoprotein)  P-糖蛋白抗原規格： 0.5mg

Pepsinogen C peptide  胃蛋白mei原C蛋白抗原規格： 0.5mg