化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
ELISA底物緩沖液 | 100ml | FS-R7291 |
儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月
用途：主要用于ELISA實(shí)驗(yàn)中配制鄰苯二胺(OPD)顯色液與氧化劑(如雙氧水)一起發(fā)生顯色反應(yīng)
注意事項(xiàng)：主要由磷酸氫er鈉、檸檬酸、防腐劑等組成
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
密歇根克雷伯氏菌滋養(yǎng)層抗原3β7抗體Human SLC16A12 ELISA Kit大鼠D-乳免疫試劑盒
平田頭菇熱休克蛋白-22抗體Human SLC16A3 ELISA Kit大鼠D-甘油3-磷免疫試劑盒
硒砷芽孢桿菌組織H4受體抗體Human SLC16A2 ELISA Kit大鼠D二聚體(D2D)免疫試劑盒
裴氏著色霉羥基類固脫氫11β2抗體Human SLAMF7 ELISA Kit大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)免疫試劑盒
釀酒酵母組織H3受體抗體Human SLC10A3 ELISA Kit大鼠C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒
瑞山海源菌磷化組蛋白H1抗體Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) ELISA Kit大鼠C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
圍小叢殼扁圓變種HEATR4蛋白抗體Human SLC12A4 ELISA Kit大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒
栗疫菌透明質(zhì)及粘蛋白1抗體Human SIX4 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子受體5(CXCR5)免疫試劑盒
新城疫病轉(zhuǎn)錄因子HES7抗體Human SIX2 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)免疫試劑盒
尖鐮孢古巴專化型宮頸黏液蛋白相關(guān)蛋白抗體Human SLC13A4 ELISA Kit大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)免疫試劑盒
玫瑰色紅球菌流感病H3N8血凝抗體Human SKAP2 ELISA Kit大鼠c-ros致癌基因1,受體酪激(ROS1)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌流感病H3N7血凝抗體Human SIX5 ELISA Kit大鼠Coronin-1A(Coro1a/Coro1)免疫試劑盒
Rhizobium multihospitium流感病H3N1血凝抗體Human SKIL ELISA Kit大鼠c-jun 免疫試劑盒
黑曲霉同源盒蛋白HoxB3抗體Human SIX4 ELISA Kit大鼠c-fos 免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型遺傳性血色病蛋白相關(guān)蛋白1抗體Human SIX5 ELISA Kit大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷3磷脂酰轉(zhuǎn)移,線粒體(PGS1)免疫試劑盒
紋黑蛋巢甘油吸收/轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GUP1抗體Human SKAP2 ELISA Kit大鼠CDCP1 免疫試劑盒
涅斯捷連科氏菌Nesterenkonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=4%科羅索
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%草質(zhì)苷
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%異鼠李-3-O-葡萄糖苷
ELISA底物緩沖液TRH ELISA Kit 大鼠促jia狀腺su釋放激su規(guī)格： 48T
ATGA/TGAB ELISA Kit 大鼠抗jia狀腺球蛋白規(guī)格： 48T
CRH ELISA Kit 大鼠促腎上皮質(zhì)激su釋放激su規(guī)格： 48T
GnRH ELISA Kit 大鼠促性腺激su釋放激su規(guī)格： 48T
LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4規(guī)格： 48T
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
化工儀器網(wǎng)