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詳細介紹
商品屬性：
| 產品名稱 | 輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣 |
| 檢測方法 | 可見分光光度法 |
| 產品規格 | 50管/24樣 |
| 產品貨號 | AS63211 |
商品介紹：
| 測定意義 輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環（TCA）的主要氫受體，生成的NADH經呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時，形成大量的ROS，同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外，NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。 測定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進一步采用MTT還原法檢測。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅱ系列
肌酸激酶(CK)測試盒100管/96樣 輔酶Ⅱ系列
肌酸激酶(CK)測試盒50管/48樣 輔酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒10管/9樣 輔酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒25管/24樣 輔酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅱ系列
蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒100管/96樣 輔酶Ⅱ系列
蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒50管/48樣 輔酶Ⅱ系列
硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅱ系列
硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅱ系列
還原酶（GR）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅱ系列
還原酶（GR）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅱ系列
還原型（GSH）測試盒100管/96樣 系列
還原型GSH）測試盒50管/48樣 列
氧化型GSSG）含量測試盒100管/96樣 系列
氧化型GSSG）含量測試盒50管/48樣 列
過氧化物酶（GPX）測試盒100管/96樣 系列
過氧化物酶（GPX）測試盒50管/48樣 列
硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）測試盒100管/96樣 系列
硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）測試盒50管/48樣 系列
轉移酶（GST）測試盒100管/96樣 系列
T3鯊 魚三碘甲狀腺原氨酸酶聯免疫試劑盒 T3 ELISA Kit
Cortisol鯊 魚酶聯免疫試劑盒 Cortisol ELISA Kit
T4鯊 魚甲狀腺素酶聯免疫試劑盒 T4 ELISA Kit
T鯊 魚睪酮酶聯免疫試劑盒 T ELISA Kit
E2鯊 魚雌二醇酶聯免疫試劑盒 E2 ELISA Kit
NDM-1新德里超級細菌金屬β-內酰胺酶-1酶聯免疫試劑盒 NDM-1 ELISA Kit
orexin小尾寒 羊增食欲素酶聯免疫試劑盒 orexin ELISA Kit
LEP小尾寒 羊瘦素酶聯免疫試劑盒 LEP ELISA Kit
POMC小尾寒 羊阿黑皮素原酶聯免疫試劑盒 POMC ELISA Kit
PMSG孕 馬血清酶聯免疫試劑盒 PMSG ELISA Kit
CORT犀 牛皮質酮酶聯免疫試劑盒 CORT ELISA Kit
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒50管/24樣T田鼠睪酮酶聯免疫試劑盒 T ELISA Kit
MAPK絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶酶聯免疫試劑盒 MAPK ELISA Kit
MAP2K5雙特異性絲裂原活化蛋白激酶5酶聯免疫試劑盒 MAP2K5 ELISA Kit
BPA雙酚A酶聯免疫試劑盒 BPA ELISA Kit
GC食蟹猴胰高血糖素酶聯免疫試劑盒 GC ELISA Kit
C-Peptide食蟹猴C肽酶聯免疫試劑盒 C-Peptide ELISA Kit
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