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詳細介紹
商品屬性：
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規格 | 100管/96樣 |
產品貨號 | AS632167 |
商品介紹：
測定意義： 羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子，造成細胞結構和功能受損，進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。 測定原理： H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應產生羥自由基，水楊酸能有效捕捉產生的羥自由基并與其反應生成有色物質2，3-二羥基苯甲酸，在510nm處有最大吸收峰，加入具有清除能力的物質后，有色物質便會減少，從而可以根據吸光值的數值判斷樣品清除羥自由基的能力。 自備實驗用品： 恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
毒蕈堿型受體M3(CHRM3)英文名：CHRM3 ELISA Kit毛細管形態發生蛋白1抗體包裝100g
毒蕈堿型受體M2(CHRM2)英文名：CHRM2 ELISA Kit肌鈣集蛋白/收鈣抗體包裝25g
凋亡蛋白激活因子1(APAF1)英文名：APAF1 ELISA Kit鈣結合蛋白樣39抗體包裝5g
淀粉樣前體蛋白(APP)英文名：APP ELISA Kit癌胚抗原相關粘附分子3抗體包裝1ml
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)英文名：APLP1 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框31抗體包裝1g
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)英文名：Aβ1-42 ELISA Kit成簇相關蛋白1抗體包裝25g
淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)英文名：Aβ1-40 ELISA Kit腫瘤/抗原2抗體包裝5g
碘腺原脫碘Ⅲ(DIO3)英文名：DIO3 ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝1g
碘腺原脫碘Ⅱ(DIO2)英文名：DIO2 ELISA Kit皮膚T淋巴瘤相關抗原5抗體（腦膜瘤表達抗原6）包裝5g
抵抗(RETN)英文名：RETN ELISA Kit腫瘤/抗原3抗體包裝10mg
低氧誘導因子2α(HIF2α)英文名：HIF2α ELISA Kit腦多巴神經營養因子抗體包裝1g
低氧誘導因子1α(HIF1α)英文名：HIF1α ELISA Kit鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關蛋白抗體包裝5g
低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP1)英文名：LRP1 ELISA Kit膽囊收縮A受體抗體包裝100mg
低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)英文名：LDLRAP1 ELISA Kit小腦肽3抗體包裝1g
低密度脂蛋白受體(LDLR)英文名：LDLR ELISA Kit周期依賴性激樣5抗體包裝1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格：>98%,BR,醋鹽形式遠端上游元件結合蛋白1試劑盒鹽伊立替康;Irinotecan hy
: ivcas7.00510資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質量規格：>920U/MG,USP原纖維蛋白-1試劑盒氧化前胡;Oxypeucedanin
Z20259資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質量規格：>97%原鈣黏1試劑盒羊藿次苷I;Icarisid I
羥自由基清除能力測試盒100管/96樣Paraconiothyrium sp. 4-乙酸乙酯植酸Elisa
火木層孔 六鈷酸鋅植酸Elisa
異常漢遜酵母 鹽酸奧洛他定癸酸甘油酯-1Elisa
鍺栓孔 (淡黃褐栓) 1-(N-Boc-氨乙基)哌40S核糖體蛋白S3Elisa
德氏乳桿保加亞亞種 4-脲脊髓灰質炎病IgG抗體Elisa
脫硫弧脫硫亞種（脫硫微螺、脫硫螺、脫硫桿、脫硫芽孢弧、脫硫弧） 乙二四乙酸銅鈉二水合物脊髓灰質炎病IgM抗體Elisa
松針散斑殼 苯基胍碳酸鹽可溶性CD28分子Elisa
生假絲酵母 5-甲基-2-基質金屬蛋白14Elisa
腫痂鏈霉 2,2-二甲基-3-羥基酸甲酯狀瘤病16抗體Elisa
光柄滑銹傘 2-甲氧基-4-甲基嘧啶狀瘤病18抗體Elisa
遼寧類芽孢桿 4-巴豆酸抗Sa抗體Elisa
蟻巢傘屬 羥酸鹽球蛋白G Fc段受體ⅠElisa
大腸埃希 球蛋白G Fc段受體ⅡElisa
運動節桿 三乙酰酮鋁性休克綜合征1Elisa
釀酒酵母 3,5-二溴吡啶-4-甲酸色P4502D6Elisa
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