詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
硫堇-橘紅G植物組織染色液 | 2×50ml | FS-R7092 |
產(chǎn)品分類:植物染色
儲存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:主要由硫堇染色液、橘紅G染色液組成,木質(zhì)化組織被染成藍(lán)色,纖維細(xì)胞被染成黃綠色,細(xì)菌被染成藍(lán)色,可以用于Synchytrium、Peronospora、Phytophthora、Sclerotinia、Botrytis、Puccinia、Fusarium、Diplodia等真菌的染色
注意事項(xiàng):因材料種類、切片厚薄的不同,染色時(shí)間也不同。同時(shí)要注意酒精脫色的程度。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
殺鮭氣單胞菌鈣粘蛋白14抗體Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狼瘡抗凝抗體(IgG)免疫試劑盒
層出鐮孢菌鈣激活離子通道蛋白3抗體Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA Kit人抗蘭堿受體鈣釋放通道抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌CD200受體抗體Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體免疫試劑盒
Pseudomonas psychrotolerans彈性蛋白1抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgM)免疫試劑盒
粗皮側(cè)耳(平菇)干生長因子受體/表面分化抗原抗體Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgG)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌CD99樣蛋白2抗體Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)免疫試劑盒
球毛殼鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌緊密連接蛋白15抗體Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA Kit人抗菌肽LL-37 免疫試劑盒
草本枝孢緊密連接蛋白12抗體Human CES5A(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)免疫試劑盒
潔小菇CHIC2蛋白抗體Human PARM1(Prostate androgen-regulated mucin-like protein 1) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)免疫試劑盒
楊奇青霉磷化周期檢測點(diǎn)激1抗體Human LETMD1(LETM1 domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgM)免疫試劑盒
青色鏈霉菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human FAF2(FAS-associated factor 2) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgG)免疫試劑盒
短芽孢桿菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human SPINK7(Serine protease inhibitor Kazal-type 7) ELISA Kit人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)免疫試劑盒
蒼黃鏈霉菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human MTX3(Metaxin-3) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)免疫試劑盒
橄欖鏈霉菌磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體Human FAM151A(Protein FAM151A) ELISA Kit人抗抗體(AsAb)免疫試劑盒
E.coli DH5α λpir遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)免疫試劑盒
雜色曲霉Aspergillus│versicolor 質(zhì)量規(guī)格:堿指示劑Ⅰ型膠原C端肽試劑盒澤瀉F
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:CPⅠ型膠原試劑盒青蒿
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.981型1-磷鞘受體試劑盒黃芪中分離物
硫堇-橘紅G植物組織染色液CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit 人肌suan激mei同工meiMB規(guī)格: 48T
PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人前列腺suan性磷suanmei規(guī)格: 48T
PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺suD合成mei規(guī)格: 48T
PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人胃蛋白mei原C規(guī)格: 48T
PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人胃蛋白mei原A規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。