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詳細介紹
原代細胞培養：
原代細胞（Primary cells）：是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養的細胞。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養：由于原代細胞生長緩慢，繁殖一定的代數停止生長（一般10代以內）。所以一般認為：培養的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
公司產品僅供科研研究實驗
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠滑膜成纖維細胞 |
組織來源 | 關節組織 |
商品貨號 | A01X1649 |
種屬來源 | 大鼠 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 滑膜是關節囊的內層 ，淡紅色 ，平滑閃光 ，薄而柔潤 ， 由疏松結締組織組成。關 節腔內的所有結構 ，除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌 帶等均全部為滑膜所包裹。 滑膜分泌滑液 ，在關節活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層 ，即薄的細胞層(內 腔層)和血管層(內膜下層) ，是血管豐富的關節囊內膜 ，貼附于非關節面部分 ，覆 蓋于關節囊內的骨面上 ，不在軟骨面上 ，此部分稱為邊緣區或“裸區"。滑膜呈 粉紅色 ，光滑發亮、濕而潤滑 ，有時可見絨毛 ， 內含膠原性纖維。 滑膜細胞有A、 B兩型。 巨噬細胞樣A型細胞 ，表面有絲狀偽足、漿膜內陷、囊泡 、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體 ，具有吞噬功能； B型成纖維樣滑膜細胞 (FLS) ，有高濃度的內質網結構 ，是介導 RA 關節破壞的主要細胞。 |
包被條件 | |
培養基 | 原代成纖維細胞培養體系 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 成纖維樣細胞 |
傳代特性 | 根據細胞特性 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養條件 | 氣相：空氣 ，95%； CO2 ， 5% |
具體步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養箱。每15min搖晃一次，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養基重懸，置于培養箱培養。
注意事項：
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通。
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