詳細介紹
原代細胞培養:
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養:由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數停止生長(一般10代以內)。所以一般認為:培養的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
公司產品僅供科研研究實驗
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠氣管平滑肌細胞 |
組織來源 | 氣管 |
商品貨號 | A01X1521 |
種屬來源 | 大鼠 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 大鼠氣管平滑肌細胞分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環,缺口向后,各軟骨環以韌帶連接起來,環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結構組成之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態,從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關鍵。 |
包被條件 | |
培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內狀態良好 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。
注意事項:
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和技術部溝通。
公司正在出售的產品:
人骨髓來源巨噬細胞 | 皺褶青霉Penicilliumrugulosum |
小鼠神經少突膠質細胞 | 粉紅單端孢霉Trichotheciumroseum |
人骨髓樹突狀細胞(DC細胞) | 發根根瘤菌Rhizobiumrhizogenes |
小鼠腎臟巨噬細胞 | 生孢梭菌Clostridium sporogenes |
大鼠小腸Cajal間質細胞 | 食神鞘氨醇桿菌Sphingobacteriumspiritivorum |
小鼠視網膜前體細胞 | 腸膜明串珠葡萄聚糖亞種Leuconostocmesenteroidessubsp.cremoris |
小鼠外周血單核細胞 | 紅串紅球菌Rhodococcuserythropolis |
人卵巢顆粒細胞 | 粘質雷氏菌粘質亞種Serratiamarcescens |
大鼠嗅上皮細胞 | 巧克力微桿菌Microbacterumchocolatum |
小鼠外周血樹突狀細胞(DC細胞) | 酸土脂環芽孢桿菌Alicyclobacillusacidoterrestris |
大鼠牙齦上皮細胞 | 芽孢桿菌Bacillussp. |
大鼠牙周膜成纖維細胞 | 假單胞菌Pseudomonassp. |
小鼠小腸Cajal間質細胞 | 大鼠氣管平滑肌細胞溶藻細菌Lysinibacillussp. |
大鼠胰島β細胞 | 煙草疫霉phytophthoranicotianae |
小鼠心臟纖維原細胞 | 掘氏疫霉Phytophthoradrechsleri |