產品名稱:小鼠環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISAKit
酶聯免疫吸附試驗
①直接法 該方法直接利用抗原 與酶聯抗體的結合,較簡單易行。A.假抗原。在聚苯乙烯酶標版的孔穴中加入待檢測的抗原(捕食者胃內含物抽提液)0.2mL,在4℃冰箱中過夜,使抗原黏附于塑料孔壁上。B.洗滌兩次,倒置于干毛巾上,使孔穴中的液體盡量流出。c.加酶聯抗體。 各孔穴中加入酶聯抗體0.2mL,在mL37℃下孵育3h,使其充分結合。d. 加底物。 用PBS充分洗滌以除去未結合的酶聯抗體,然后加入底物(鄰苯二胺)0.2 mL,于37℃反應30min,用2mol/L硫酸0.05 mL終止反應。e. 用ELISA檢測儀測定其吸光度值,分別設陽性、陰性和空白對照,以確定陽性反應臨界值。
②雙抗體夾心法 該方法與直接法的不同在于吸附抗體。a. 包被抗體。酶標板的孔穴中加入0.2 mL抗體(用PH=9.6/0.05mol/L碳酸鹽緩沖液稀釋),置37℃水浴中孵育3h,移入4℃冰箱過夜。將各孔中多余的抗體傾去,加入PBS洗滌,立即甩去,再將PBS加滿各板孔,置5min,甩去溶液,如此洗滌2次,倒置于干毛巾上,使孔穴中的液體盡量流出。b. 加待檢抗原。沒孔中加入待檢捕食者胃內含物抽提液0.2 mL.同時設陽性、陰性和空白(PBS)對照,37℃水溶中孵育3h,轉入冰箱中過夜。如上法洗滌3次。C. 加入酶聯抗體。每孔加入酶聯抗體0.2 mL,37℃水浴孵育2h,如上法洗滌3次。d. 加底物。 每孔加入底物鄰苯二胺0.2 mL, 37℃水浴孵育1h,加入2mol/L硫酸0.05,以終止反應。e. 用 ELISA檢測儀測定其吸光度值。
③間接法 與前兩種方法不同點在于酶聯抗體與抗原的間接結合。a. 每孔加入待檢抗原0.2 mL ,4℃冰箱中過夜,使抗原黏附于塑料孔壁上。并依上法洗滌3次。b. 每孔加0.2 mL,用PBS稀釋的抗體,37℃孵育2-3h。c.用PBS洗滌3次后,加入溶于PBS的酶聯抗體0.2mL,37℃孵育2-3h。d. 加底物,方法同上。e. 用ELISA檢測.
其他產品:人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA 試劑盒
人脂肪酸結合蛋白(FABP)ELISA試劑盒
人腺苷三磷酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
人羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA 試劑盒
人葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)ELISA 試劑盒
人低密度脂蛋白(LDL)ELISA 試劑盒
人花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒
人骨涎蛋白(BSP)ELISA 試劑盒
人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA 試劑盒
人環磷酰胺(CTX)ELISA 試劑盒
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA 試劑盒
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA 試劑盒