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黃曲霉毒素B1快速檢測方法

閱讀:5694        發布時間:2015-5-19

黃曲霉毒素B1快速檢測方法

    黃曲霉毒素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的化學物質中致癌性zui強的一種。黃曲霉毒素 B1 對人和若干動物具有強烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質檢總局規定黃曲霉毒素B1是大部分食品的必檢項目之一。本品的黃曲霉素B1檢測靈敏度為 5ng/ml(5ppb)。

黃曲霉素B1檢測檢測原理

    本品采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術,通過單克隆抗體競爭結合 AFB1-BSA 偶聯物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(T)的 AFB1-BSA 偶聯物和被膠體金標記的抗 AFB1 單克隆抗體。

黃曲霉毒素B1快速檢測方法【樣 品 制 備】
1. 谷物:任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩,準確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發皿或小玻璃杯中,用電吹風吹干上清液,再根據樣品的種類按以下規定的稀釋液量,用鋁箔袋內配套吸管反復沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對黃曲霉毒素 B1 的zui高含量要求,請參考下表進行用稀釋液溶解杯底固體

2. 飼料(以黃曲霉素B1檢測殘留* 50ppb 計算):任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩,準確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 0.5ml 到蒸發皿或小玻璃杯中,用電吹風吹干上清液,再以 2ml 的稀釋液量用鋁箔袋內配套吸管反復沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液。如果黃曲霉素B1檢測殘留*是 30ppb,則用 1.2ml 的稀釋液溶解;如果殘留*是 40ppb,則用 1.6ml 的稀釋液溶解。

3. 食用油:稱 2.0g 油樣于小燒杯中,用 8ml 正乙烷分次將試樣轉移至分液漏斗中,準確加入 4ml 純凈水充分振蕩 3min,吸去上層正乙烷層,再加入4ml 的乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,靜置或 3000rpm 離心得上清液,將上清液用吸管移出 2ml 到小玻璃杯中,用電吹風吹干,再用稀釋液溶解后為樣品提取液。

4. 醬油、醋、發酵酒:稱取 25.0g 樣品于小燒杯中,用 5ml 蒸餾水將試樣轉移到分液漏斗中,加入 20ml 三氯甲烷,加塞輕輕振搖 3min,靜置分層。放出下層三氯甲烷層,經盛有約 5g 預先用三氯甲烷濕潤的無水過濾器于蒸發皿中,zui后用少量三氯甲烷洗滌過濾器,洗液并于蒸發皿中,用電吹風吹干。吹干冷卻后,準確加入稀釋液,將蒸發皿中的凝結物充分溶解。

黃曲霉毒素B1快速檢測方法【黃曲霉素B1檢測步驟】
1. 在進行黃曲霉素B1檢測前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復至室溫;

2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開后平放在桌面上,請在 1 小時內盡快使用;

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴于加樣孔中,加樣后開始計時;

4. 結果應在 10min 內讀取,超過 12min 的時間判讀無效。


【黃曲霉素B1檢測結果判定】

1. 陽性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不顯色時,或者位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 顯示顏色非常模糊時,判為陽性。陽性結果表明:AFB1 含量超過樣品允許量。

2. 陰性:位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 同時顯示出紅色線條,且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時,判為陰性。陰性結果表明:AFB1 含量低于樣品允許量。

3. 無效:位置 C 不顯示出紅色線條,而位置 T 顯示出紅色線條,該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。

【黃曲霉素B1檢測注意事項】

1. 請按照操作步驟進行黃曲霉素B1檢測,操作時請勿觸摸試紙顯示區。

2. 如購買時發現過期,破損,污染,無效的產品,請到購買處進行更換。

3. 黃曲霉素B1檢測試紙卡為一次性產品,請勿重復使用。

4. 如遇稀釋液不足,請用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。

5. 本品為篩選試劑,任何陽性結果請用其他方法做進一步確認。

6. 有條件的實驗室可以用 AFB1 標準品測試后作為判斷參考。

【儲藏條件與有效期】
本品應保存在干燥陰涼處(4--30℃),有效期 18 個月。

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