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移液器如何*改變了世界...
閱讀：2034 發布時間：2021-11-9
簡介
微量移液器是一種移取微量液體的新型實驗工具,是進行生化實驗、微生物學實驗和分子生物學實驗的工具。移液器為量出式量器,分定量移液器和可調移液器兩大類。其型式分為單頭型和多頭型。微量移液器主要包括手動移液器和電子移液器兩種。微量移液器的容量規格范圍為0.1uL~5mL,滿足液體的精確取樣和轉移的需要。
第一只活塞微升移液器是Eppendorf公司于1958年發明的,1960年獲得該發明的權。該公司擁有各種規格的、品牌的微量移液器。目前,國內外生產的微量移液器品牌眾多,并根據不同的使用功能開發出不同用途的產品,例如整支可消毒的移液器、半支可消毒的移液器、電動移液器、PCR專用移液器、大容量移液器和電子連續移液器等、微量移液器的操作使用。
移液器操作及注意事項
(一)設定取液值
移液器為活塞式吸管,以活塞在活塞套內移動的距離確定移液器的容量,利用空氣排放的原理進行工作。移液器的容量即移液量,在移液器把柄的顯示窗上可清楚顯示。
轉動移液器的調節旋鈕可進行移液量的設定:反時針方向轉動旋鈕,可提高取液量;順時針方向轉動旋鈕,可降低取液量。調整旋鈕時不要用力過猛,還應注意移液器顯示的數值不應超過其可調范圍。
(二)吸液
(1)選擇吸頭放在移液器套筒上,稍加壓力使其與套筒之間無空氣間隙。
(2)把按鈕壓至第一停點【見圖2a)】,垂直握持加樣器,使吸頭浸入液面下3mm~5mm處,然后緩慢平穩地松開按鈕,吸入液體[見圖2-2b)]。等待1s~2s后從液體中取出。
（三)放液
(1)將吸頭口貼到容器內壁底部并保持傾斜,平穩地把按鈕壓到第一停點[見圖2-2e)],等待1s~2s再把按鈕壓到第二停點以排出剩余液體[見圖2-2d)]
(2)壓住按鈕,同時提起加樣器,使吸頭貼容器壁擦過[見圖2-2d]。松開按鈕[見圖2-2e)],按吸頭彈射器除去吸頭。
(四)微量移液器的操作注意事項
(1)勿將微量移液器本體浸入溶液中。
(2)如吸取黏度高的試液,可先將微量移液器頭以刀片或剪刀將出口切大,并先行預潤后再吸取。
(3)吸取酸液或具腐蝕性溶液后,將微量移液器拆解開,各部位零件以蒸餾水沖洗干凈,擦干后再正確組合回復原狀。
(4)微量移液器的任何部分切勿用火燒烤,也不可吸取溫度高于70℃的溶液,避免蒸氣侵入后腐蝕活塞。
(5)套有微量移液器頭的微量移液器,無論微量移液器頭中是否有溶液,均不可平放,需直立架好。
(6)若不小心使溶液進入吸管柱內時,應盡快予以拆解,將活塞組件、吸管柱、O型圈、鐵氟龍墊等各部位以清水沖洗干凈后,再以酒精擦拭,擦干后再正確組合回復原狀。
微量移液器的性能校驗
(一)氣密性檢測
移液器吸滿液體后,手持垂直放置15s,檢查吸嘴的尖頭有無液滴,如有,則說明漏氣。
(二)準確性檢測
1.量程小于1uL,建議使用分光光度法檢測。將移液器調至目標體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的稀釋度(334nm或340nm),重復幾次移液操作,計算移液器的精確度。
2.量程大于1uL,可以用稱重法檢測。通過對水的稱重,轉換成體積(體積=質量/密度),鑒別移液器的準確性。由水的密度是隨著溫度交化而變化,且稱量天平本身精確度不符合檢測要求,檢測又大多在一個開放式空間操作,偏差在所難免。因面,此種稱量只能現場粗略地判斷移液器的確性進一步的校準必須在專業的實驗室操作進行。
注意：稱重法實驗室條件是高度靈做的分析天平(定期校準)、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時水的密度為0.0982g/cm3)。
(三)專業校準
移液器經過長期使用,彈簧的彈力會發生變形,加之本身又是塑料材質不耐磨擦,因而就會產生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準確性,必須對移液器進行定期校準。為了更好地發揮該類計量儀器的作用,對新購進的儀器要進行校準后才能使用:對正在使用的計量儀器,由于長期使用會造成示值與度量對象的誤差,這種誤差若不及時校正,必定會影響測試和科研工作,因此,對使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使移液器在日常工作中更好的發揮作用。
目前,在許多實驗室條件下進行的常規檢測并不能*取代專業的校準工作,因為校準對于外部環境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術要求,而這些條件往往是大多數實驗室無法提供的。現在一些大型的移液器制造商均采用全球統一的移液器標準操作規范,通過計算機對分析天平的測量,數據采集、計算、結果評價等環節進行在線控制,即利用專業軟件校正控制系統完成。也就是說所有的人為操作都被計算機記錄并隨報告打印出來,而電腦對數據的評估認證也是在同期進行并完成的,*排除了人為操縱校準結果的可能性。
（四)微量移液器的標定
合格的移液器在使用一段時間后,由于敲打、磨損或液體吸入吸管柱內等原因均有可能導致其精確度下降,因此需進行標定。移液器1年至少標定1次。蒸餾水稱量法標定移液器則是常用的方法。
1.標定條件
室溫(20℃士5℃);蒸餾水水溫與室溫溫差不得大于2℃。
2.步驟
(1)將移液器調至擬定校準體積,選擇合適的吸頭。
(2)根據核查點選擇天平,見表2-1。
(3)將稱量杯放入天平中,待天平顯示穩定后,調零。
(4)來回吸吹蒸餾水3次,使吸頭濕潤,用紗布拭干吸頭。
(5)垂直握住移液器,將吸頭浸入液面2mm~3mm處,緩慢地吸取蒸餾水。
(6)將吸頭離開液面,去掉外部的液體。以30°放入稱量杯中,緩慢地將移液器壓到第1擋,等待1s~3s,再壓到第2擋,使吸頭里的液體*排出。
(7)記錄稱量值。
(8)擦干吸頭表面。
(9)重復3次移取及稱量,取平均值計算移液器的容量允許誤差及重復性。
(10)多量程移液器應根據實際量程進行3點核查。
(11)填寫和保存校準記錄。
3.計算方法
(1)實際容量的計算
移液器在標準溫度20℃時的實際容量由式(2-3)計算:
V20=m×Z(t)…………………(2-3)
式中:
V20一標準溫度20℃時移液器的實際容量,mL;
m一移液器移取的蒸餾水表觀質量,g;
Z--Z因子,由表2-2査得,cm3/g;
t一核查時蒸餾水的溫度,℃。
表2-2蒸餾水在不同溫度和壓強下的Z因子
(2)容量相對誤差的計算
式中:
E--容量相對誤差,%;
V一標稱容量,uL;
圖片3次測量的算術平均值,uL;
計算結果保留2位有效數字。
(3)容量重復性的計算
計算公式見下式：
計算結果保留2位有效數字
4.核查結果判定
不同量程移液器的核査點及其在標準溫度20℃時的容量允許誤差與重復性應符合JJG646《移液器檢定規程》要求。單量程、特殊量程移液器參照相應核查點進行核查。
5.核查結果處理
如果出現任意核查不符合要求的情況,應立刻換人進行第二次核查,如第二次核查仍不符合要求,則停止使用該移液器,并加貼紅色停用標簽,同時申請外部計量檢定。
微量移液器的維護及保養
1.維護
(1)移液器不用時,應在專用支架上豎直放置。
(2)每天使用前,應檢查移液器外表面是否有灰塵和污物,要注意移液器的嘴錐處,只能用70%的酒精溶液清潔。
(3)如液體不小心進入活塞室應及時清除污染物。
(4)根據使用頻率,所有的移液器應定期用肥皂水清洗,或用60%的異丙醇消毒,再用雙蒸水清洗并晾干。
(5)移液器使用完畢后,把移液器量程調至最大值,且將移液器垂直放置在移液器架上。
(6)避免放在溫度較高處以防變形致漏液或不準。
(7)使用時要檢查是否有漏液現象。
方法是吸取液體后懸空垂直放置幾秒,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有以下幾方面:
①槍頭是否匹配。
②彈簧活塞是否正常。
③如果是易揮發的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題,可以先吸放幾次液體,然后再移液。
2.保養
經常使用的移液器,每半年應保養一次。從移液器的拆卸開始,步驟如下:
(1)按下管嘴推頂桿,將配置工具的端插入推頂桿底部的槽孔中,拔出管嘴推桿軸套和管嘴推頂桿。
(2)用配置專用工具反時針方向轉動嘴錐并拆下,拔出柱塞桿。
(3)從嘴錐桿上拆下O型圈。注意5uL~50uL的移液器有兩個O型圈,可利用柱塞桿的細端拆下它們。
(4)用一塊干燥無絨布清潔柱塞桿、柱塞彈簧和O型圈,檢查柱塞體是否有灰塵顆粒。
(5)擦凈零件并涂上高真空活栓脂膏,將各零件重新組裝成移液器。
(6)重新檢定。