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更新時間:2024/11/5 10:50:57
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CCK-8細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 活動* 日期2017年3月20日-2017年7月20日
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 活動價 | 品牌 |
GK3607-500T | CCK-8 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | 500T | 620.00 | 372.00 | Genview |
CCK-8試劑盒可用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢測等。 Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8,是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
CCK-8基于WST-8,與MTT類似,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原
生成橙黃色的formazan。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。
使用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定OD值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。CCK-8對細(xì)胞無明顯毒性。加入CCK-8顯色后,
可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到*測定時間。
CCK-8優(yōu)勢:
1、使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;
2、能快速檢測;
3、檢測靈敏度很高;
4、重復(fù)性優(yōu)于MTT 法;
5、對細(xì)胞毒性小;
6、即用型溶液,無需配置,使用方便。
注意事項(xiàng)
1、使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入2,000個細(xì)胞/100ul培養(yǎng)基,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入
5,000個細(xì)胞/100ul培養(yǎng)基(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等因素決定。
按照實(shí)驗(yàn)需要,進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10ul特定的藥物刺激。
2、酚紅和血清對CCK-8法的檢測不會造成干擾,可以通過減去空白孔中本底的吸光度而消除。
3、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。
4、CCK-8可以檢測大腸桿菌,但不能檢測酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每次測定的過程中需要避免細(xì)菌污染,
以免影響結(jié)果
5、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時,培養(yǎng)板zui外一圈的孔容易干燥揮發(fā),導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,
zui外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測定孔用。
6、在培養(yǎng)基中加入CCK-8,培養(yǎng)一定的時間,測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實(shí)驗(yàn)時,
還應(yīng)考慮藥物的吸收,可在加入藥物的培養(yǎng)基中加入CCK-8,培養(yǎng)一定的時間,測定450nm的吸光度作為空白對照。
7、金屬對CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、 銅會5%、15%、90%的抑制顯色反應(yīng),
使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會*抑制顯色反應(yīng)。
8、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難,一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長培養(yǎng)時間。
MTT和CCK-8細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒可以滿足常規(guī)的細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性的檢測,主要缺點(diǎn)是形成的formazan
水溶性很差,需要額外的步驟溶解formazan。
如果對細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性的檢測要求靈敏度非常高,并且希望非常便捷,在研究經(jīng)費(fèi)許可的條件下,
建議選擇使用Cell Counting Kit-8。
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