DNA的分離和提取中一般要用到離心機三次:
*次離心是在細胞破碎后,目的是除去溶液中的固體雜質。
第二次離心是在*次離心的上清中加入苯酚/氯仿/異戊醇溶液以后,目的是將DNA和蛋白質等雜質分離。
第三次離心是在第二次離心的上清中加入氯仿/異戊醇溶液之后,目的是進一步純化DNA、并除去上一步中引入的苯酚。
為什么要要冷凍的離心機呢,雖然冷凍或低溫會對細胞造成DNA損傷,影響結果。但冷凍條件下能夠很好地把核酸DNA沉淀下來,若采用室溫離心,必需要提高轉數才能在相同時間內獲得相當的沉淀量。溫度不合適情況下的離心分離會加速DNA降解或者斷裂。
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