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ELISA試劑盒關于解酶結(jié)合物的稀釋液及方法:
A、正確稀釋酶結(jié)合物
a)酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預實驗來確定,濃度過高易導致本底偏高,濃度過低則會導致陽性信號的減弱。
b)酶結(jié)合物在使用前稀釋,稀釋后的酶結(jié)合物不宜長期保存,因為低濃度的酶結(jié)合物極易失活。
B、酶結(jié)合物的稀釋液
a)在稀釋液中常加入高濃度的無關蛋白質(zhì)(例如1%BSA或5%脫脂奶粉),通過競爭抑制酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附。
b)一般還加入能夠抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑,如吐溫20(0.05%的濃度較為適宜)。
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