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一文帶您了解免疫親和柱的操作方法

閱讀：2358 發(fā)布時間：2022-3-3

　　毒素(Tetrodotoxin,TTX)是豚魚類（俗稱河豚魚）及其它生物體內(nèi)含有的一種生物堿（氨基全氫喹唑啉型化合物），是自然界中所發(fā)現(xiàn)的毒性至大的神經(jīng)毒素之一。其毒性比劇毒還要高1250多倍，0.5mg即可致人于死命。

　　免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素，從而對樣品起到非常針對性的純化作用，過柱凈化后的樣品液可直接用于HPLC分析。它與HPLC配合使用可達到快速測定的目的，以改善信噪比，提高檢測方法的準(zhǔn)確度。

　　測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，抗體連接在柱體內(nèi)，樣品經(jīng)過提取、稀釋，緩慢的通過免疫親和柱，在柱內(nèi)毒素與抗體結(jié)合，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。用洗脫液洗脫毒素，然后注入到分析儀器中用于檢測。

　　下面咱們來了解下免疫親和柱的操作方法：

　　1、取出本產(chǎn)品，將注射器筒的下端直接穿透親和柱上方的塞子，完成柱筒與柱的連接，將其放置在氣控操作架上進行固定，去掉親和柱下方堵頭，排盡柱內(nèi)保存液。

　　2、取10mL的待上樣液，注入到注射器筒中。

　　3、調(diào)節(jié)開關(guān)，使液體以1~2滴/秒的速度流出。

　　4、待液體排干，用10mL蒸餾水洗滌1次，流速2~3滴/秒。

　　5、待液體排干，往柱管內(nèi)加入2mL洗脫液，堵上親和柱堵頭靜置2min，用試管收集洗脫液，流速1滴/秒，再加入2mL洗脫液，收集洗脫液，待液體排干后，將洗脫液于40℃下氮氣吹至近干，用流動相定容至1mL。

　　6、混勻后用0.22μm濾器過濾至樣品瓶進行液相檢測。

　　7、使用前，需回至室溫（22~25℃）。

　　8、每次上樣前都要將柱內(nèi)上次液體*排干。

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