菌落總數小常識
菌落總數的測定方法，看似非常簡單，但由于食品種類繁多，食品中可能存在的微生物菌群較多，要在同等條件下把所有的細菌培養出來，反應樣品的真實情況，實屬不易。
一、能力實驗的目的
開展能力驗證試驗是檢驗實驗室檢測能力和提高檢測水平的重要手段。利用實驗室間的比對，對實驗室的校準或檢驗工作進行判定。
關鍵是，能力驗證是考察實驗室檢驗能力的外部質量活動，組織方提供試驗樣本，在菌落總數項目上，一般會考慮增加上述難度。
二、測定標準
食品國家標準：GB 4789.2-2016 《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數測定》
三、操作過程
（一）、前期做好充足的準備工作：
根據國家標準，提前準備好要用的平板計數瓊脂、平皿、試管、稀釋液（生理鹽水）、三角燒瓶等。
（二）、樣品接受：
收到樣品后，確認樣品包裝是否完好，并將其保存在2~8℃冰箱中，然后在能力驗證平臺進行確認。
（三）、樣品處理：
按照作業指導書操作（一定要仔細閱讀作業指導書）看看是幾個樣品及實驗記錄要求。一般實驗室收到的是干粉樣品或者是固體樣品等。假如收到的是干粉樣品，那么步就要水化。
樣品水化步驟（建議）：一般能力驗證樣品以國體粉末形式發放，以液體（CFU/mL）形式出報告。樣品水化前一定要認真、仔細閱讀作業指導書，看看用多少稀釋液水化，水化后作為原液還是多大濃度的樣品來記錄。
（四）、實驗前準備：
a、能力驗證時最好在超潔凈臺或者生物安全柜里操作，這樣就要把超潔凈臺或者生物安全柜提前清理、消毒處理，確保實驗環境無菌。
b、提前把要用到的平皿、試管、稀釋液等放到操作臺上。
（五）、實驗操作：
a、稀釋
將樣品從冰箱中取出達到室溫后開啟使用，在超潔凈臺或者生物安全柜下先用少許稀釋液（選取的生理鹽水）進行水化后吸入無菌瓶或袋中，再用剩余的稀釋液進行洗滌并全部轉入無菌瓶或袋中。（具體公需多少稀釋液要看作業指導書說明）
洗滌轉移時注意樣品瓶蓋的清洗和無菌操作，將全部的水化液進行均質混勻，一般作為原液立刻進行接種；再取25mL到225mL稀釋液中均質混勻，制成10-1梯度樣品勻液。
用1mL無菌吸管取1:10的樣液到9mL生理鹽水試管中，制成1:100的樣液，以此類推。再將幾個稀釋度的樣液接種到提前做好標記的無菌平皿中。
b、傾注平板
將提前在水浴鍋里涼至46℃的平板計數營養瓊脂培養基注入平皿約15mL，并轉動平皿，混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內作空白對照。傾注過程一般左手拿平皿，右手拿瓊脂瓶，左手將平皿打開30度左右的縫隙，傾注瓊脂大約到平皿底的二分之一處，左三圈、右三圈輕輕混勻，然后放到臺面上。
待瓊脂凝固后，翻轉平板，置36±1℃溫箱內培養48±2h。
e、觀察計數
最好，第二天先看看，檢測結果有沒有異常、是否有蔓延菌落出現。
按照GB 4789.2的要求進行菌落計數
f、上報數據
在對結果進行分析后，選取檢測結果的平均值進行網絡提交。
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