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新喋呤檢測試劑盒(酶聯免疫法)
ELISA方法操作洗板過程常見問題及解答
1) 采用手工洗板, 孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。
解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后*在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
3) 手工洗板,每次加液后浸泡30s左右,保證洗板的效果。
通用名稱:新喋呤檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名稱:Neopterin ELISA
產品貨號:RE59321
產品規格:96T
檢測樣本:血清和血漿、尿液
公司品牌:德國IBL
儲存條件:2-8℃
檢測方法:ELISA方法
預期用途:可用于體外診斷定量檢測人血清、血漿和尿液中的新喋呤含量
參考價格:詢價
供應商家:深圳市科潤達生物工程有限公司
新喋呤ELISA試劑盒預期用途
新喋呤檢測試劑盒可用于體外診斷定量檢測人血清、血漿和尿液中的新喋呤含量。
新喋呤簡介
新喋呤生物合成與細胞免疫系統的活性關系密切,據報道在病毒感染病人新喋呤升高,認為升高源于直接防御病毒感染細胞的免疫應答。已證實抗原刺激人外周血單核細胞可引起新喋呤釋放入細胞培養液中,人巨噬細胞在體外培養時受γ-干擾素刺激產生新喋呤。
人體液中新喋呤水平的測定為細胞介導免疫的相關疾病監測提供了一種有用和創新的工具。許多傳染病,新喋呤水平升高先于臨床表現和血清變化。通常樣本不會進行所有可能的傳染病測定,因此為了降低輸血傳染的危險性,對獻血員樣本進行新喋呤測定是有意義的。
測定新喋呤的其它診斷應用有:
●重復損傷的ICU病人
●用于預測HIV感染和惡性疾病
●移植手術后病人并發癥的早期預測
●自身免疫性疾病、疾病活動的指征
●病毒感染的診斷
●急性病毒和細菌感染的鑒別診斷
●慢性感染復發和免疫刺激治療的監測
新喋呤ELISA試劑盒檢測原理
本實驗應用固相的競爭ELISA原理。樣本中的抗原和酶標記的抗原競爭抗體的結合位點(兔抗新喋呤)??乖?抗體復合物連結到包被了羊抗兔抗體的酶標板上。未連結的抗原經洗滌步驟除去。底物反應后形成的顏色強度與樣本中抗原的量成反比例關系。樣本的濃度可以直接在標準曲線中讀出。
新喋呤檢測試劑盒組成成分
●微孔板——12×8——微孔中包被了羊抗兔IgG(多克?。?br/>●抗血清——1×8ml——即用型、含抗血清(兔)、磷酸鹽緩沖液、穩定劑
●酶聯物——1×13ml——即用型、含HRP標記的新喋呤、磷酸鹽緩沖液、穩定劑、避光保存
●標準品A~F——6×1.5ml——濃度:0、1.35、4.0、12.0、37.0、111nmol/L即用型、含新喋呤、磷酸鹽緩沖液、穩定劑
●質控1+2——2×1.5ml——即用型、濃度/可接受范圍見質控單
●分析緩沖液——1×21ml——即用型、含磷酸鹽緩沖液、BSA、穩定劑
●洗滌液——1×50ml——20倍濃縮、含吐溫、穩定劑
●底物液——1×19ml——含TMB、緩沖液、穩定劑
●終止液——1×19ml——即用型、含1M硫酸
●封板紙——1×
新喋呤檢測所需材料(試劑盒內不提供)
●移液器,體積10、50、100、1000ul
●混合器
●定軌振蕩器(500rpm)
●8通道移液器,帶加樣槽
●洗滌瓶,自動或者半自動洗板機
●450nm酶標儀(參考波長為600-650nm)
●雙蒸水或去離子水
●吸水紙,吸頭和計時器
新喋呤檢測試劑盒儲存條件
新喋呤檢測試劑盒運輸和儲存的溫度為2~8℃。避免直接的光照和加熱。微孔板拆封后保存在密封袋中2~8℃,可以穩定至有效期。
新喋呤檢測試劑盒檢測步驟
●移取20ul的標準品、質控品、血清、血漿和稀釋的尿液樣本至相應的孔中
●每孔加入100ul的酶聯物
●每孔加入新喋呤抗血清50ul
●蓋板,避光在振蕩器(500rpm)、室溫(18~25℃)下溫育90分鐘
●移去封板紙,倒出孔中溶液,洗板4次,每次每孔使用300ul稀釋的洗滌液。在吸水紙上拍干
●對于底物液和終止液的使用,建議使用8通道的移液器,確保每孔加入的時間間隔是相同的。避免氣泡的產生
●每孔加入150ul的底物液
●室溫(18~25℃)下溫育10分鐘
●每孔加入150ul的TMB終止液終止反應。輕輕震動包被板使溶液混勻
●在15分鐘內于450nm的酶標儀上讀數(參考波長是600~650nm)
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