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腎上腺素ELISA試劑盒
腎上腺素ELISA試劑盒產品詳細
中文名稱 | 腎上腺素ELISA試劑盒 |
英文名稱 | Adrenalin ELISA (Epinephrine) |
產品貨號 | RE59251 |
產品規格 | 96T |
檢測樣本 | 血漿和尿液 |
適應物種 | 人 |
預期用途 | 可用于人血漿和尿液中腎上腺素的體外定量檢測 |
儲存條件 | 2~8℃ |
產品品牌 | 德國IBL |
供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
腎上腺素ELISA試劑盒預期用途
腎上腺素ELISA試劑盒可用于人血漿和尿液中腎上腺素的體外定量檢測。
腎上腺素ELISA試劑盒檢測原理
腎上腺素ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上,而抗原分子可在溫育期內結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內溫育,此酶標二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從標準曲線上讀取。
腎上腺素ELISA試劑盒貯存與穩定性
腎上腺素ELISA試劑盒和運輸環境和儲存環境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩定性及試劑的準備將在相關章節中闡述。開封的試劑盒在有效期內穩定,前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環境下。
腎上腺素ELISA試劑盒成分
注意:試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分
數量 | 標志 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,多克隆抗體)。 |
1×6×2.5ml | CAL A-F | 標準品A-F,即用 腎上腺素:0;1.5;5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L) 去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L) 多巴胺:0;60;180;585;2300;11470ng/mL (0;392;1175;3819;15014;74876nmol/L) 內含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(有生物活性),0.1M的HCl |
1×2×2.5ml | CONTROL 1+2 | 質控品1+2 即用,內含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽. |
1×400μL | ENZCONJ CONC | 酶聯物 濃縮型(50×) 內含:堿性磷酸酶標記的抗體,Tris緩沖液,HCl,0.01%的NaN3 |
2× | EXTRPLATE | 提取板(微孔板) 每板24孔,包被了硼酸親和凝膠。 |
1×60ml | EXTRBUF | 提取緩沖液 粉紅色,即用,內含:0.016%的NaN3。 |
2×1.25ml | C OMT LYO | C OMT凍干粉 內含:兒茶酚-氧位-甲基轉移酶(豬肝),NaN3 |
1×2ml | C OMT ADD | C OMT添加劑 內含:人血漿,穩定劑,0.01%硫柳汞。 |
1×8ml | ANTISERUM AD | 腎上腺素抗血清 綠色,即用,內含:抗腎上腺素抗體(兔),緩沖液,穩定劑。 |
2×1.25ml | COENZ | 輔酶溶液 即用,內含:S-腺苷-L-蛋白酸,穩定劑。 |
1×3ml | ENZBUF | 酶緩沖液 即用,內含:Tris緩沖液,HCl,穩定劑。 |
1×13ml | RELEASEBUF | Release緩沖液 黃色,即用,內含:0.1M的HCl,指示劑。 |
1×3ml | ACYLREAG | 酰化試劑 即用,內含:二甲基甲酰胺,乙醇。注意:有毒,高可燃性。 |
1×100ml | WASHBUR CONC | 洗滌液 濃縮型(10×) 內含:Tris緩沖液,HCl,吐溫,0.2%的NaN3 |
1×25ml | PNPP SUBS | PNPP底物片 內含:對硝基苯磷酸(PNPP) |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液 即用,內含:1M的NaOH,0.25M的EDTA |
3× | FOIL | 粘性金屬板 |
腎上腺素ELISA試劑盒實驗所需器材(但試劑盒不提供)
■移液器(10;10-100;100-1000μL)
■軌道搖床(200-900rpm)
■旋渦混合器
■帶儲器的8通道移液器
■洗滌瓶,自動或半自動包被板清洗系統
■酶標儀
■雙蒸水或去離子水
■吸水紙,取樣吸頭,計時器
■樣本稀釋試管
■0.1M HCL,用于尿液樣本稀釋
腎上腺素ELISA試劑盒檢測步驟(手工版)
1.C OMT酶溶液的準備
注意!C OMT酶溶液現配現用 |
用1.25mL的蒸餾水溶解C OMT,混勻*;然后將1.25mL的輔酶液、1.25mL酶緩沖液和0.40mL的C OMT附加液混勻到C OMT酶溶液中,終定容到4.15mL/支。3支分別用于檢測腎上腺素,去甲腎上腺素和多巴胺。溶液可能有些渾濁。充分混勻,避免起泡。C OMT溶液在室溫下能保持穩定1小時 |
*如果C OMT溶液只需要使用一部分,剩下的C OMT溶液應該在-20℃下分裝凍存。這些C OMT溶液在上述條件下能穩定保存1~2個月。
1.樣本、標準品和質控品的酶衍生化(微孔板)
注意 | 如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素,我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型洗液器加樣,請將取樣吸頭內的殘余液體加入到提取板的相應微孔內,否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前,確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。 |
尿液與血漿中的去甲腎上腺素
1 | 在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的C OMT酶溶液,輕輕振蕩。 |
2 | 將100ul提取的標準品,質控品和樣本加入至相應的孔內,在此步驟中,將槍頭直接觸碰C OMT酶溶液,顏色會轉為粉紅色,輕輕混勻 |
3 | 在每一微孔中加入50ul腎上腺素抗血清(綠色)。 |
4 | 蓋板,在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育120min |
5 | 移去粘性金屬板,棄取孔內反應液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板4次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
6 | 在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯物。 |
7 | 蓋板,在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育60min |
8 | 移去粘性金屬板,棄取孔內反應液,每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板4次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。 |
9 | 如果可以的話,使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同,使用自動置換型移液器并避免氣泡產生。 |
10 | 在每一微孔中加入200ulPNPP底物液 |
11 | 在振蕩器(400-600rpm)上室溫(18-25℃)溫育40min |
12 | 在每一微孔中加入50ul PNPP終止液,輕輕振板以使溶液混合均勻。 |
13 | 加終止液后60min內405nm處讀取OD值。(參考波長:620-650nm) |
期望值
實驗結果不能當作判斷任何治療結果的為一因素,疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下結果為正常人群的正常值(5%-95%),建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍:
尿液 | 血漿 | |||
μg/d | nmol/d | pg/mL | nmol/L | |
去甲腎上腺素 | <20 | <110 | <125 | <0.68 |
國內售后單位:深圳市科潤達生物工程有限公司
辦公地址:深圳市坪山區坑梓街道坑梓中興路14號6棟301A
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