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人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)酶免試驗
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)產品詳細
中文名稱 | 人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x) |
英文名稱 | Human amyloid β (Aβ) (1-x) |
產品貨號 | 27729 |
產品規格 | 96T |
檢測樣本 | EDTA-血漿,腦脊髓液,血清,細胞上清或腦組織提取液 |
適應物種 | 人 |
預期用途 | 用于EDTA-血漿,腦脊髓液,血清,細胞上清或腦組織提取液中人Aβ(1-x)的定量檢測 |
產品品牌 | 日本IBL |
供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)實驗原理
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)是一種夾心法的ELISA試劑盒,使用了兩種高特異性的抗體。TMB作為顯色劑,終溶液所顯示的顏色強度與樣品中Aβ(1-40)的量成正比。
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)檢測范圍
7.81~500pg/mL(1.8~115.5pmol/L,Aβ(1-40)分子量為4331)
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)試劑盒預期用途
僅供研究使用,不能用于診斷,此試劑盒用于EDTA-血漿,腦脊髓液,血清,細胞上清或腦組織提取液中人Aβ(1-x)的定量檢測,血清中的Aβ(1-x)非常不穩定,檢測值會不會減少則取決于保存條件,如果上清樣品中含有胎牛血清(FCS),那么FCS內的Aβ(1-x)可能會被檢測到,建議設置一陰性質控,天然和重組的人Aβ(1-x)都可用此試劑盒檢測。
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)試劑盒組成成分
1.微孔板,96T,包被有抗人Aβ(N)(82E1)小鼠IgG單抗
2.標記抗體濃縮,30X,0.4ml,HRP標記的抗人Aβ(11-28)小鼠IgG 單抗
3.標準品,0.5ml,2支,人Aβ(1-40)
4.EIA緩沖液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐溫20的PBS
5.標記抗體稀釋液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐溫20的PBS
6.著色劑,TMB,15ml
7.終止液,1N硫酸,12ml
8.洗滌緩沖濃縮液,40X,50ml,0.005%吐溫20的磷酸緩沖液
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)試驗所需材料但試劑盒未提供
■酶標儀(450nm)
■移液器和槍頭
■有刻度的燒杯和量筒
■蒸餾水
■冰箱(4℃)
■坐標紙(對數-對數)
■吸水紙
■標準品稀釋管
■洗瓶
■一次性試驗管
人淀粉樣蛋白β(Aβ)(1-x)實驗步驟
使用前,所有樣品應平衡至室溫,大約30min,然后充分混勻,確保試劑質量無變化,標準曲線和樣品檢測同時進行
試劑 | 檢測樣品 | 標準品 | 檢測樣品對照孔 | 試劑對照孔 |
檢測樣品 100ul | 稀釋標準品(1-7管)100ul | EIA緩沖液(第8管) 100ul | EIA緩沖液100ul | |
蓋板,4℃下溫育過夜 | ||||
洗板7次 | ||||
酶標抗體 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
蓋板,4℃下溫育60min | ||||
洗板9次 | ||||
顯色劑 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
室溫避光溫育30min | ||||
終止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
加終止液后30min內450nm處讀取OD值 |
1.確定好空白對照孔,并在相應的微孔中加入100ul EIA緩沖液。
2.確定好樣品對照孔,檢測樣品孔和標準品孔,然后分別將100ul樣品對照品、檢測樣品和稀釋好的標準品加入到相應的微孔中。
3.蓋板,4℃下溫育過夜
4.用洗滌瓶洗板,在微孔中加入洗滌液浸泡15-30秒,棄去洗滌液。重復7次,后在吸水紙上拍干。如果是用洗板機洗板時,用洗板機洗四次后,再用洗滌瓶洗3次。
5.每孔加100ul酶標抗體,除試劑空白對照孔外
6.蓋板,4℃下溫育60min
7.按照步驟4)洗板9次
8.將所需量的顯色劑加入到試管中,然后在每一微孔中加入100ul顯色劑。為了避免污染,請勿將剩余試劑在倒入原裝試劑瓶中。
9.室溫避光溫育30min,加入顯色劑后溶液顏色會變成藍色
10.在每孔加100ul終止液,此時溶液顏色會變成黃色
11.擦去微孔板底部的污點或水滴,終止液加入后30min內,在酶標儀450nm處讀數
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