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斑點熱群立克次體IgG ELISA試劑盒(酶聯免疫法)
ELISA操作顯色過程常見問題及解答
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 使用變質的顯色劑。
3) 未使用完畢的顯色劑返回原瓶造成污染
4) 顯色反應不避光,或有陽光直射
解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用;
2) A、B 液應避免接觸金屬器械。
3) 使用量根據樣本需要量取,取出后未使用完畢的顯色液應棄去,不能再次返回原試劑瓶,以免造成顯色液污染,影響下次使用;
4)TMB對光敏感,一般顯色反應要避光進行;
斑點熱群立克次體IgG ELISA試劑盒詳細表
中文名稱 | 斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒(酶聯免疫法) |
英文名稱 | Spotted fever Group Rickettsia EIA IgG Antibody Kit |
產品貨號 | SFG-96k |
產品規格 | 96T |
檢測樣本 | 血清、血漿 |
適應物種 | 人 |
預期用途 | 用于人血清、血漿中抗斑點熱群立克次體IgG的體外定性檢測 |
產品品牌 | 美國fuller |
供應商家 | 深圳市科潤達生物工程有限公司 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒預期用途
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒用于人血清、血漿中抗斑點熱群立克次體IgG的體外定性檢測。
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒成分
名稱 | 數量 | 成分作用 |
微孔板 | 12×8 | 包被有斑點熱群立克次體外脂多糖抗原(rLPS) |
樣品稀釋液 | 2×50ml | 含牛血清蛋白及吐溫20、Mercury sulfide的PBS緩沖液 即用型 |
酶聯物 | 1×12ml | 辣根過氧化物酶標記的抗人IgG 即用型 避光保存 |
陽性質控 | 1×120μl | 1:10預稀釋 |
臨界質控 | 1×200μl | 1:10預稀釋 |
陰性質控 | 1×120μl | 1:10預稀釋 |
底物液 | 1×12ml | 琥珀色瓶,含TMB底物液以及Hydrogen peroxide 即用型 避光保存 |
終止液 | 1×12ml | 含稀釋好的硫酸 即用型 避免接觸皮膚 |
PBS緩沖液 | 吐溫20 1×2ml | 將試劑盒提供的小包加入到1L蒸餾水中 以配置PBS緩沖液 加入到1L的PBS緩沖液中 配制成洗液。 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒檢測原理
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒微孔板中包被有從斑點熱群立克次體中提取出的脂多糖(rLPS)。病人血清用樣品稀釋液稀釋,之后樣品被加入到微孔中孵育。孵育過程中,血清抗體與微孔板抗原發生特異性結合。洗板洗去未結合的部分,之后加入酶標的抗人IgG。
孵育過后洗板,洗去未結合上的酶聯物。之后加入酶底物液反應。形成藍色,顏色的深度與樣品中特異性IgG的濃度成正比。定時反應后,加入終止液,顏色變黃,微孔板使用酶標儀在450nm下讀取吸光值。
斑點熱群立克次體IgG實驗檢測所需材料(試劑盒內不提供)
★ | 蒸餾水 |
★ | 洗瓶 |
★ | 試管 |
★ | 移液器 |
★ | 粘性蓋板 |
★ | 450nm讀數酶標儀 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒儲存及穩定
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒應2-8℃保存,在實驗前應先平衡至室溫(20-25℃)剩余的微孔板需密封保存在包裝袋中。
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒檢測步驟
1. | 移取陽性質控、陰性質控、臨界質控、樣品各100μl到相應的微孔中,臨界質控做雙孔檢測。 |
2. | 蓋板,在室溫下孵育60分鐘 |
3. | 使用洗滌液洗板至少3次,并在吸水紙上拍干。 |
4. | 每孔加入100μl酶聯物 |
5. | 蓋板,在室溫下避光孵育30分鐘 |
6. | 洗板同步驟3 |
7. | 每孔加入100μl TMB底物液,暗光下準確孵育10分鐘 |
8. | 每孔加入100μl終止液 |
9. | 使用酶標儀在450nm波長下讀取吸光值 |
斑點熱群立克次體IgG檢測試劑盒檢測期望值
由于地域及檢測人口的不同,檢測值也會存在差異。在病區中,癥狀不明顯或者只出現輕微癥狀的病人的檢測,血清陽性率約為1%~26%。
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