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Picarro+LI-2100 | 雙同位素+功能基因-研究無土栽培系統中N2O的生產和消耗過程
中國是最大的溫室蔬菜生產國,約占世界生產面積的83%。由于全年生產和大量施肥,溫室蔬菜產量高,但也導致了土壤質量的惡化和嚴重的環境問題。近來,無土栽培系統(SCS)在溫室蔬菜生產中逐漸發展起來,它可以減少甚至消除傳統栽培方式的許多問題,。在SCS中,無土栽培基質,也稱為無土栽培生長介質,可代替土壤固定根系系統,為植物提供水分和養分,為根區提供充足的通風。然而,由于N肥的大量輸入,N2O排放較高。N2O是一種溫室氣體,具有溫室效應,加劇全球變暖,在大氣中存留時間長,可輸送到平流層,導致臭氧層破壞,引起臭氧空洞。無土栽培基質已成為SCS中N2O排放的主要載體,但尚不清楚其產生和消耗的相關途徑,因此亟待研究SCS無土栽培基質的N2O排放源。且無土栽培基質與土壤理化和生物性質高度不同,其具有更準確的水和養分分布,因此也有必要確定管理措施對SCS中N2O排放的影響。
基于此,在本文中,來自中國農業科學研究院的一組研究團隊基于穩定同位素技術結合qPCR分析在兩種灌溉模式下(滴灌和潮汐灌溉)對成都市農林科學院((103°86′E,30°71′N)溫室里兩種無土栽培基質(60%泥炭+20%珍珠巖+20%蛭石+少量植物纖維/商用椰殼纖維基質)進行了相關研究,共設置4種處理:滴灌+泥炭基質(PD),滴灌+椰殼基質(CD),潮汐灌溉+泥炭基質(PT)以及潮汐灌溉+椰殼基質(CT)。旨在:(1)研究兩種灌溉模式下典型無土栽培基質的N2O排放,(2)評估N2O排放及其驅動因子之間的關系以及(3)理解N2O生產和消耗的微生物機制。
作者于2020年3月12日在育種室進行西紅柿播種,4月9日轉移至溫室中。施肥后的不同時間里收集氣體樣品,計算NH3和N2O通量,并測量N2O同位素值。同時,收集了無土栽培基質樣品,去除可見根系,過篩,測定質量含水量(ω),計算充水孔隙度(WFPS)。然后測定無土栽培基質的NH4+-N、NO3--N、pH、導電率(EC)、有機質(OM)。提取基質中的總DNA,進行qPCR分析。此外,利用全自動真空冷凝抽提系統(LI-2100,北京理加聯合科技有限公司)提取基質樣品中的水分,利用Picarro L115-I同位素分析儀測定水的δ18O值。通過δ18O和δ15NSP關系圖來區分N2O生產和消耗途徑。
【結果】
四種處理下(A)總含水量(B)NH4+-N(C)N2O通量(D)充水孔隙度(E)NO3--N以及(F)NH3通量的時間變化。
基于pearson相關方法的不同參數之間的相關性熱圖。
δ18O和δ15NSP關系圖(A)以及N2O生產和消耗的微生物過程的貢獻(B)。BN:細菌硝化作用;AN:古細菌硝化作用;ND:硝化細菌反硝化作用;BD:細菌反硝化作用。Ni:BN + AN;De:BD + ND。
N2O排放由微生物組而非礦物N含量決定,由基因豐度而非基因拷貝數決定。在N2O產生途徑上,泥炭基質以反硝化為主,椰殼基質以硝化為主。在無土栽培系統中,N2O還原(還原-混合)的情況可能更接近現實。反硝化和N2O還原受基質類型而非灌溉方式的影響顯著,且在泥炭基質中貢獻較大。綜上所述,N2O排放及其微生物過程是由基質類型決定的,而非灌溉模式。更重要的是,N2O同位素值和功能基因相結合可闡明N2O產生和消耗的微生物過程。