高內(nèi)涵篩選(high content screening, HCS)技術(shù)，指在保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整性的前提下檢測被篩樣品，分析其對細(xì)胞形態(tài)、生長、分化、遷移、凋亡、代謝途徑及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等各個(gè)環(huán)節(jié)的影響，在單一實(shí)驗(yàn)中獲取大量與基因、蛋白及其他細(xì)胞成分相關(guān)的信息，從而實(shí)現(xiàn)對化合物多靶點(diǎn)、多參數(shù)的同時(shí)檢測，確定其生物活性和潛在毒性的過程。這種量化的方法適用于大規(guī)模藥物篩選、藥理毒理實(shí)驗(yàn)等等。以往在獲取細(xì)胞圖像時(shí)，由于被測樣品量大，而顯微鏡檢測視野小、操作繁瑣，檢測一張96孔板需要幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間，難以滿足實(shí)驗(yàn)需求。今天我們以24孔板為例為大家演示如何利用THUNDER實(shí)現(xiàn)高內(nèi)涵快速掃描成像。
首先設(shè)定好紅綠雙色通道和曝光時(shí)間，選擇適合高內(nèi)涵快速成像的ICC THUNDER方法，然后進(jìn)入LAS X Navigator導(dǎo)航式界面。
然后點(diǎn)擊carrier，去選擇對應(yīng)孔板的模具，那這邊我們選擇24孔板即可出現(xiàn)對應(yīng)畫面。
那比如我們想在每個(gè)孔中做隨機(jī)10個(gè)點(diǎn)的多點(diǎn)掃描，點(diǎn)擊ok可出現(xiàn)10個(gè)位置固定的模式。
那如果想要10個(gè)點(diǎn)的位置不一樣，我們可以勾選random，這樣10個(gè)點(diǎn)的位置是隨機(jī)的。
此外，我們還可以調(diào)整點(diǎn)的分布，讓其更靠近中心或邊緣。比如，更靠中心一些，ok，那這樣可以看到10個(gè)點(diǎn)更聚集在孔的中央。
或者，我們還可以進(jìn)行拼圖，比如，做一個(gè)5X5的拼圖，這樣可以看到每個(gè)孔中有一個(gè)5X5視野的拼圖。
或者可以以孔的覆蓋度來進(jìn)行拼圖。比如我們選擇60%的覆蓋度，可以看到是這個(gè)樣子。
這里以5X5拼圖為例，可以看到右下角24個(gè)孔拍完總共需要的時(shí)間和數(shù)據(jù)大小。
設(shè)置完成后，點(diǎn)擊start進(jìn)行拍攝。拍攝完成之后，可通過鼠標(biāo)滾輪對每個(gè)孔的拼圖進(jìn)行放大查看，也可以對任意一個(gè)孔的圖像進(jìn)行查看。圖像清晰、無拼接痕跡。
以上多孔板高內(nèi)涵快速成像的操作就完成了。
在操作視頻里，我們可見THUNDER可隨心所欲地控制多孔板高內(nèi)涵快速成像；直觀又準(zhǔn)確無誤的操作讓您用非常少的投入便實(shí)現(xiàn)從圖像采集到創(chuàng)建報(bào)告；從此，您無需在學(xué)習(xí)軟件操作上花費(fèi)大量的精力，將更多的時(shí)間投入到研究中！
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