線粒體活性氧ROS檢測試劑盒（純化線粒體）-綠色熒光
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/25 16:59:57
- 訪問次數(shù) 93
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保存溫度
-20℃ 避光
注意事項(xiàng)
1.避免反復(fù)凍融。
2.可以根據(jù)需要分裝后凍存。
3.探針為DMSO溶液，在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
2.可以根據(jù)需要分裝后凍存。
3.探針為DMSO溶液，在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，冬季氣溫較低時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱融解，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
有效期
6個(gè)月
檢測方法
1.熒光酶標(biāo)儀 2.熒光光度計(jì)
適用樣本
純化線粒體
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.使用方便：可用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀檢測；
2.背景低，靈敏度高；
3.線性范圍寬，使用方便。
2.背景低，靈敏度高；
3.線性范圍寬，使用方便。
儀器準(zhǔn)備
1.熒光酶標(biāo)儀 2.熒光光度計(jì)， 2.離心機(jī) 3.移液器 4.冰箱 5.冰盒
試劑準(zhǔn)備
PBS緩沖液或者HBSS
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
4.黑色96孔板
2.吸頭
3.一次性手套
4.黑色96孔板
使用注意事項(xiàng)
1.O07染色液為DMSO溶液，冬季氣溫較低時(shí)在室溫時(shí)為凝固狀態(tài)，極易粘附在管壁、吸頭壁。注意需要加熱溶解，吸頭也需要放在培養(yǎng)箱預(yù)熱，否者容易再次凝固在吸頭內(nèi)壁產(chǎn)生損耗。 2.使用前，先將本品取出回溫至室溫，并對(duì)其進(jìn)行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。 3.細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。 4.標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求、細(xì)胞類型、膜通透性等進(jìn)行優(yōu)化，確定條件。以下方法僅供參考。 5.染色后立即進(jìn)行分析。 6.熒光酶標(biāo)儀檢測必須使用熒光檢測專用的黑色96孔板。
使用方法
染色工作液配制： 根據(jù)樣本數(shù)量，用染料稀釋液將BBcellProbe® O07熒光染料10倍稀釋，再用PBS緩沖液或者其它等滲緩沖液20-40倍稀釋，配制成染色工作液。 O07探針標(biāo)記： 1.準(zhǔn)備新鮮待測線粒體。 【注】: ?一般為大約總蛋白量為10～100 μg的純化的線粒體。 2.將線粒體樣本用200 μl染色工作液重懸，充分混勻。 3.在37℃避光孵育20-60分鐘。 4.孵育結(jié)束后，離心收集線粒體。 5.用PBS清洗線粒體一次。離心收集線粒體。 6.用200 μl PBS重懸線粒體。充分混勻。 7.加入熒光檢測用黑色96孔板。 8.置于酶標(biāo)儀中，后于激發(fā)波長為488 nm、發(fā)射波長526 nm檢測熒光強(qiáng)度。 【注】: ?此處以酶標(biāo)儀檢測為例。 ?根據(jù)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備情況，沒有酶標(biāo)儀的話根據(jù)所使用的熒光光度計(jì)所需上樣體積重懸線粒體檢測。 結(jié)果處理： 熒光強(qiáng)度強(qiáng)表示線粒體活性氧強(qiáng)度高。 【注】： ?熒光強(qiáng)度強(qiáng)則活性氧（ROS）含量高。 ?可以用實(shí)驗(yàn)中對(duì)照樣本的熒光強(qiáng)度值為基準(zhǔn)，待測組樣本的熒光強(qiáng)度值占對(duì)照樣本的百分比來比較活性氧（ROS）程度差異。
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