《發(fā)酵飼料中乳酸的測定 高效液相色譜法》意見征集
【化工儀器網(wǎng) 政策標(biāo)準(zhǔn)】乳酸(IUPAC學(xué)名：2-羥基丙酸)是一種化合物，它在多種生物化學(xué)過程中起作用。在發(fā)酵過程中乳酸脫氫酶將丙酮酸轉(zhuǎn)換為左旋乳酸。在一般的新陳代謝和運(yùn)動中乳酸不斷被產(chǎn)生，但是其濃度一般不會上升。只有在乳酸產(chǎn)生過程加快，乳酸無法被及時運(yùn)走時其濃度才會提高。該類化合物在發(fā)酵工業(yè)中用于控制 pH 值和提高發(fā)酵物純度。
目前，測定乳酸含量的分析方法主要是滴定法，該測定方法的原理為：供試品加水溶解后，再精密加入氫氧化鈉滴定液(1mol/L)25mL，煮沸5分鐘，加酚酞指示液2滴，趁熱用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，酚酞指示液變紅時停止滴定，讀出硫酸滴定液使用量，計算乳酸含量。
近日，按照寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂項目工作安排，由寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會提出并歸口，寧夏大學(xué)、寧夏飼料工程技術(shù)研究中心、寧夏獸藥飼料監(jiān)察所、寧夏飼料工作站、寧夏農(nóng)林科學(xué)院、寧夏昊標(biāo)檢測服務(wù)研究院、寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會起草的《發(fā)酵飼料中乳酸的測定 高效液相色譜法》征求意見稿已經(jīng)完成。現(xiàn)按照寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會《團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂程序》的要求，公開征求意見。征求意見截止時間為2020年5月10日。
《發(fā)酵飼料中乳酸的測定 高效液相色譜法》主要內(nèi)容包括范圍、規(guī)范性引用文件、原理、試劑與材料、儀器和設(shè)備、試樣制備與保存、測定步驟、分析結(jié)果的計算、重復(fù)性。該項新的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了發(fā)酵飼料中乳酸含量高效液相色譜法，適用于發(fā)酵飼料中乳酸含量的測定。
利用高效液相色譜法測定發(fā)酵飼料中乳酸含量的方法原理為：利用乳酸易溶于水的特點(diǎn)，乳酸加水超聲提取后，稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛龋囈哼^濾膜進(jìn)高效液相色譜儀經(jīng) C18 色譜柱分離，在 210nm 波長下紫外檢測器(或性能相當(dāng)?shù)臋z測器)檢測，外標(biāo)法計算乳酸的含量。
檢測使用的試劑和材料有乙腈、磷酸、0.1%磷酸溶液、氫氧化鈉、0.1mol/L 氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、酚酞、0.1%酚酞指示劑溶液。測定用的儀器和設(shè)備包括分析天平、超聲波清洗器、微孔濾膜、容量瓶、高效液相色譜儀(配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器)。
測定步驟包括樣品溶液制備、高效液相色譜條件、平行試驗(yàn)、空白試驗(yàn)、乳酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液溶液的制備、高效液相色譜儀測定這幾個方面。其中，樣品溶液制備過程為：稱取試樣 1g~5g(精確至 0.0001g)，置于 100 mL 容量瓶中，加 60mL 水，在 50℃水浴中超聲提取 20 min，冷卻至室溫，用水定容至刻度，搖勻，過濾，取濾液稀釋，使后稀釋液中乳酸的濃度均在工作曲線之內(nèi)，取部分稀釋液過 0.45 um 濾膜，濾液作為試樣溶液。
以上標(biāo)準(zhǔn)在制修訂的過程中引用參考了《GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》、《GB/T 601 化學(xué)試劑 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備》、《GB/T 14699.1 飼料 采樣》。
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